Кафедра судебной медицины лечебного факультета ГОУ ВПО РГМУ им. Н.И. Пирогова, г. Москва
Давность наступления смерти (ДНС) – один из основных вопросов, решаемых судебно-медицинскими экспертами.
Особенно актуальна в судебно-медицинском отношении проблема определения ДНС в поздние сроки посмертного периода [3, 4].
В связи с вышеизложенным определилась цель данного исследования - разработать дополнительные объективные критерии повышающие точность установления давности наступления смерти, основанные на применении метода спиновых зондов с использованием стекловидного тела глаза в позднем постмортальном периоде.
Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
Для установления ДНС наиболее перспективным, с нашей точки зрения, является метод спиновых зондов электронного парамагнитного резонанса (ЭПР), получивший широкое применение в биологии и медицине. Данный метод позволяет улавливать изменения в разлагающихся тканях на клеточном и молекулярном уровне, имеет возможность исследовать мутные среды, так же обладает высокой воспроизводимостью результатов.
Метод ЭПР применялся в судебной медицине для установления ДНС, прижизненности и давности причинения травмы [1, 2].
С целью повышения точности диагностики ДНС в первые 2 недели посмертного периода нами изучена скорость восстановления спинового зонда стекловидного тела глаза человека.
Исследования проведены на практическом судебно-медицинском материале. В ходе выполнения работы нами изымались глазные яблоки путем захвата и вытягивания с одновременным рассечением окружающих его структур. Всего исследовано объектов от 38 трупов, лиц обоего пола в возрасте от 26 до 90 лет, умерших от различных причин смерти. Точное время наступления смерти было известно из сопроводительных документов. Секционный материал хранили при температуре 21±20С и относительной влажности 40-60%.
Для диагностики ДНС в качестве спинового зонда использовали водорастворимый зонд 1-oxyl-4-oxo-2.2.6.6-tetramethyl-piperidin.
Стекловидное тело в объеме 0,3 мл получали путем пункции глазного яблока. Пункцию осуществляли стерильным медицинским шприцем с иглой для внутримышечных инъекций. Вкол иглы производили через роговицу отступя от радужной оболочки на 0,2 см, соблюдая определенное направление иглы – несколько кзади и к центру глаза, глубина проникновения не превышала 8-12 мм [3, 4]. Затем извлеченное стекловидное тело помещали в стандартную заводскую планшетку для иммунологических исследований, добавляли по 30 мкл раствора зонда в концентрации 102 и проводили измерения ежедневно со дня изъятия объекта и в течении последующих 30 суток.
Величина скорости реакции восстановления спинового зонда стекловидным телом определялась многократно путем записей центральной компоненты ЭПР-спектра с интервалом времени каждые 5 минут, до полного исчезновения сигнала или до стабилизации показателей. Результаты наших исследований после статистической обработки с помощью программы Statistica показали, что константа скорости реакции восстановления спинового зонда с 1 по 2 сутки снижается не значительно, с 3-х по 12 сутки определяется резкое снижение скорости реакции восстановления спинового зонда, далее с 12-х по 23 сутки показатель практически не изменяется (Таблица 1).
Таблица № 1 Показатели скорости реакции восстановления спинового зонда M±m на различных сроках постмортального периода
T (сутки) | n | M±m | T (сутки) | n | M±m |
1 | 16 | 1,6±0,11 | 8 | 12 | 0,3±0,01 |
2 | 18 | 1,5±0,05 | 9 | 11 | 0,2±0,007 |
3 | 14 | 1,2±0,1 | 10 | 13 | 0,1±0,01 |
4 | 15 | 0,79±0,017 | 11 | 12 | 0,09±0,02 |
5 | 15 | 0,6±0,008 | 12 | 10 | 0,01±0,003 |
6 | 16 | 0,49±0,006 | 13-23 | 38 | 0,009±0,003 |
7 | 14 | 0,4±0,007 |
Где Т – значение давности наступления смерти в сутках;
n – количество экспериментов для Т;
M– среднее значение
m - ошибка средней
Проведенный статистический анализ показал, что по величине константы скорости восстановления спинового зонда можно определить ДНС в интервале с 1 по 12 сутки, т.е. на поздних сроках посмертного периода, с точностью до 1 суток, с вероятностью ошибки между 1 и 2 сутками 0,8, между 10 и 11 сутками 0,6, а в остальные временные интервалы 0,05 и менее.