Сравнительная оценка методов изолирования миансерина из биологического материала

Publication in electronic media: 07.04.2013 under http://journal.forens-lit.ru/node/960
Publication in print media: Актуальные вопросы судебной медицины и медицинского права. Материалы научно-практической конференции с международным участием, посвященной памяти профессора В.О. Плаксина – Москва 2011

ГБУЗ СО БСМЭ, г. Екатеринбург;
Кафедра токсикологической химии ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия», г. Пермь

Психофармакология и психофармакотерапия депрессивных состояний являются динамично развивающимися направлениями, а антидепрессанты — препаратами, занимающими второе место по назначению среди всех психотропных средств (после бензодиазепинов). Столь высокий рейтинг данных психотропных средств обусловлен тем, что около 5 % населения земного шара страдает депрессиями (по данным ВОЗ) [1].

Миансерин (синонимы: леривон, миансан, Bolvidon, Lerivon, Miansan, Norial, Tolvin, Tolvon) – антидепрессант четырехциклической структуры. Обладает антидепрессивным, седативным и снотворным действием. Показан при депрессивных состояниях различного генеза. При передозировке наблюдается продолжительный седативный эффект, аритмия, судороги, выраженная артериальная гипотензия, угнетение дыхания.

При приеме внутрь миансерин хорошо абсорбируется из ЖКТ. Cmax достигается через 2-4 ч и составляет 6-19 нг/мл плазмы. Биодоступность составляет около 20 % из-за эффекта «первого прохождения» через биохимически активные ткани (слизистые оболочки кишечника, печень). Равновесная концентрация в крови при ежедневном приеме достигается через 6 дней. Связывание с белками плазмы – 96 %. Метаболизируется в печени путем деметилирования и окисления с последующей конъюгацией метаболитов. Выводится (частично в виде метаболитов) с мочой (70 %) и с желчью (8-28 %) [2].

По химической структуре миансерин (1,2,3,4,10,14b гексагидро-2метилдибензо-[c,f]-пиразино-[1,2-а]азепина гидрохлорид относится к группе пиразино-азепиновых соединений.

C18H20N2 • HCl

Молекулярный вес миансерина (основания) – 264,4 миансерина гидрохлорида – 300,8.

Растворимость: в воде 1 к 50, в этаноле 1 к 100, в хлороформе 1 к 20 [4].

В практике судебно-химического отделения ГБУЗ СО БСМЭ (г. Екатеринбург) встречаются случаи смертельных отравлений препаратом «Миансерин». Однако анализ данных литературы свидетельствует о том, что систематических исследований по разработке методик изолирования, обнаружения и количественного определения миансерина не проводилось.

В связи с этим, целью настоящего исследования явилось изучение эффективности существующих методов изолирования токсикантов для извлечения миансерина из биологических объектов.

Миансерин в своей структуре содержит два третичных атома азота и обладает основными свойствами, следовательно, будет изолироваться из щелочной среды.

Нами было проведено сравнительное изучение общих методов изолирования лекарственных веществ из биологического материала – метода Васильевой (изолирование водой, подкисленной щавелевой кислотой) и метода Стаса-Отто (изолирование подкисленным щавелевой кислотой спиртом). А также апробированы применительно к миансерину частный метод изолирования на амитриптилин [3] и солянокислый гидролиз.

В качестве стандартного образца были использованы метанольные растворы миансерина с концентрацией 1000 мкг/мл в пересчете на основание миансерина.

Экспериментальная часть

К 30 г измельченной печени (серии по 10 проб) прибавляли по 1 мг миансерина (метанольный раствор). Пробы тщательно перемешивали на электровстряхивателе в течение 1 часа, затем оставляли при комнатной температуре на сутки. Извлечение в первой серии опытов проводили подкисленной водой по методу Васильевой, во второй – подкисленным спиртом по методу Стаса-Отто; в третьей – подкисленным спиртом по методике изолирования на амитриптилин [3], в четвертой – после солянокислого гидролиза экстракцией смесью хлороформ-изопропанол 9:1. Очистку извлечений проводили путем реэкстракции 0,01 н раствором соляной кислоты. В качестве внутреннего стандарта использовали метанольный раствор феназина (производства фирмы «Вектон») с концентрацией 20 мкг/мл.

Количественное определение проводили методом ГХ/МС на газовом хроматографе Agilent Technologies 6890N, оборудованном массселективным детектором Agilent Technologies 5975C. На хроматограммах, полученных в результате исследования, наблюдали пик со временем удерживания и масс-спектром, соответствующими миансерину. Расчет количественного содержания миансерина проводили с использованием внутреннего стандарта. В эфирном извлечении из кислого раствора при изолировании по методам Васильевой и Стаса-Отто миансерин не обнаруживался.

Результаты

Сравнительная оценка эффективности методов изолирования миансерина из биологического материала представлена в таблице 1.

Полученные в результате эксперимента данные свидетельствуют, что наибольший выход миансерина из биоматериала был получен при изолировании по частному методу на амитриптилин – 78,7 %.

Таблица 1 – Процент извлечения миансерина из биологического материала при использовании различных методов

Выводы

1. В ходе исследования на модельных смесях миансерина и биобъекта проведена сравнительная оценка эффективности следующих методов изолирования: по Васильевой, по Стасу-Отто, частному методу на амитриптилин и после кислотного гидролиза.
2. Наибольший процент изолирования в условиях модельного эксперимента (78,7 %) получен после изолирования миансерина по частному методу на амитриптилин (спиртом, подкисленным щавелевой кислотой). Остальные методы недостаточно эффективны и позволяют выделить лишь до 15,7 % миансерина.

Использованные источники

1. Андрющенко А.В. Выбор терапии при депрессиях // Современная психиатрия. – 1998. – Т. 1. – № 2. – С. 10-14.
2. Машковский, М.Д. Лекарственные средства. – 16-е изд.,
3. перераб., испр. и доп. – М.: Издательство Новая Волна, 2010.
   – С.108-109.
4. Методические указания «Об определении амитриптилина при химико-токсикологическом исследовании биологического материала», – Москва, 1979.
5. Moffat A.C. Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons [Electronic Edition] / А.С. Moffat, M.D. Osselton, B. Widdop. – London: Pharmaceutical Press, 2004.